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【热文●递】 今日份研究报告 NO.040

时间:2020-01-01 22:35
谷氨酸棒状杆菌CRISPR-Cpf1 /单链DNA基因组编辑系统优化|报告

王挺,马宏坤,公民统一蔡宁,张芝,陈宁
摘要:谷氨酸棒杆菌作为重要的微生物细胞工厂,基因组修饰已成为调整目标代谢物的主要手段。为了提高建立CRISPR-Cpf1 /单链DNA基因组编辑系统的定点突变的编辑效率有效地节省。作为选择标记,它构建一个单链严格模型菌株M-1,和统计数据用于验证使用卡那霉素抗性的编辑效率。首先,使用强启动子Ptuf,以优化切割效率;其次,使用该单链DNA的重组酶和RECT合理长度的添加量,以优化重组效率。结果表明:该启动子Ptuf和RECT的双重作用下,使用随链(70个碱基,12.5微克)优化组合,以提升(80±5.7)%的基因编辑效率。 RECT介导由CRISPR-Cpf1 /基因组的ssDNA编辑系统谷氨酸代谢工程加快很大程度上。
关键词:谷氨酸棒状杆菌优化编辑的CRISPR-Cpf1单链DNA基因组
关键词:CRISPR-Cpf1单链DNA谷氨酸棒状杆菌优化基因组编辑
硫L启动子模块,以改善 - 蛋氨酸发酵条件的影响,以及优化的生物合成|报告
金立群,熔金伟,刘志强
摘要:生物合成L-硫甲硫氨酸生产模块和优化发酵条件。使用重组菌株实验室建设,trc启动子替换cysK基因组组成型启动子,插入,glpE和nrdH在质粒pA的* H基因;通过构建PG3启动子库,以得到的p32启动子,进一步优化模块的硫的最高强度的转录,最后通过优化培养基供给硫代硫酸盐,L-蛋氨酸,从而提高成品率的改善。结果表明:使用大肠杆菌W3110 JAHFEBL TRC-cysK构建体获得/ PA * H-P32 nrdH-glpE应变,发酵在摇瓶中48小时L-蛋氨酸生产水平达到130克/升,与对照组相比提高41.5%;通过媒体进一步优化,L-蛋氨酸最终产生为2.3g / L,比未优化的发酵水平增加77.0%,和其它含硫氨基酸的生物合成的研究提供了基础。
关键词:L - 蛋氨酸子硫同化优化模块合成硫代
关键词:L-蛋氨酸子优化硫同化合成硫代
研究报告|体内筛选系统大肠杆菌Aβ42聚集抑制剂建立在β-内酰胺酶内
赵温屏,佳隆刚,路福平刘富丰*
摘要:β淀粉样蛋白(A-β)的错误折叠和聚集的是阿耳茨海默氏病(早老性痴呆,AD),的的Aβ聚集抑制剂和用于AD缓解所必需的治疗的发展的主要原因。积累TEM1-β-内酰胺酶(TEM1-β内酰胺酶,βlac)和Aβ42和Aβ42使用βlac196-197之间插入的氨基酸残基的分子生物学方法,构建BL21-βlac-Aβ42重组菌株的特征性结构特征。使用公知的聚集抑制剂Aβ42,斑点通过滴定实验验证,实验板涂覆细胞浓度检测实验。结果表明,在浓度条件下改善的生长条件加入抑制剂AB42,BL21-βlac-Aβ42已知的特定的应变氨苄青霉素(氨苄青霉素,放大器中)的后,允许的最大稀释度的增加微生物的细胞的细胞生长,表明该融合系统大肠杆菌可应用于体内筛选Aβ42聚集抑制剂。体内高的研究取得了淀粉样蛋白聚集抑制剂吞吐量微生物的筛选,聚集药物新的抗Aβ的发展奠定了基础。
关键词:阿尔茨海默病β淀粉样蛋白42(Aβ42);所述TEM1-β-内酰胺酶(βlac);在大肠杆菌体内筛选系统聚集抑制剂的融合蛋白表达
关键词:阿尔茨海默病(AD);淀粉样β蛋白42(Aβ42); TEM1-β内酰胺酶(βlac);在大肠杆菌中的体内筛选系统融合蛋白聚集抑制剂的表达
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